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細(xì)胞名稱 Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人細(xì)胞；GBC-SD-Cas9-775

形態(tài)特性: 上皮樣

生長特性: 貼壁生長

特征特性: 該細(xì)胞是采用慢病毒感染的方式使GBC-SD細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)Cas9-Flag-Puro，經(jīng)2.0ug/mlPuromycin篩選得到的單，經(jīng)WesternBlotting驗(yàn)證該可以表達(dá)Cas9蛋白，可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。

培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS；2.0ug/mlPuromycin

傳代方法: 1:2~1:6傳代；2~3天換液1次。

傳代情況:

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

特別聲明：本產(chǎn)品及我公司所售其他產(chǎn)品均為科研類試劑產(chǎn)品，嚴(yán)禁用于藥物、醫(yī)療及其他非科研用途。

傳代方法：

產(chǎn)品僅用于科研收到細(xì)胞后，取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況。

（一）如果細(xì)胞未長滿，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。。

（二）如果細(xì)胞已長滿，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：

1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶，細(xì)胞隨即脫落下來。

3. 加入6-8ml完全培養(yǎng)基，吸出，分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二。

注意：傳代后一半用我們的培養(yǎng)基，一半用你們的，以免細(xì)胞不適應(yīng)而造成生長不好。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。

5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6）產(chǎn)品僅用于科研觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
注意事項(xiàng)：

1.接收到細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張）。

2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。

3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。

4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。

5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。

6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。

7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。

多紫杉 Dasatinib 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品載脂蛋白A1抗體

1,1'羰基二 Daptomycin 質(zhì)量規(guī)格：≥930μg/mg,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)髓系、淋巴、混合系易位基因10抗體

2,3二咪... Daptomycin 質(zhì)量規(guī)格：效價(jià)測定腺瘤樣抗體

6羥基并三... Daunorubicin HCl 質(zhì)量規(guī)格：純度大于97%含量84.002%,USP30腺苷環(huán)化酶1抗體

2代 Daunorubicin HCl 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品雄激素受體相關(guān)蛋白24抗體

4,5二氰基咪唑 Daunorubicin HCl 質(zhì)量規(guī)格：USP,進(jìn)分sigmaD8809 淀粉樣肽前體蛋白抗體（C端）

4基肉桂 Decitabine 質(zhì)量規(guī)格：>99.5%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)載脂蛋白C3抗體

反基肉桂 Decitabine 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品腺苷環(huán)化酶2抗體

1,2二異... 5Aza′deoxycytidine 質(zhì)量規(guī)格：>97%,進(jìn)分sigma貨號A3656 載脂蛋白E4抗體

2嗎啉基基異腈 Deslorelin Acetate 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR自噬相關(guān)基因AMBRA1抗體

三... Desmopressin Acetate 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR,醋鹽形式化自噬相關(guān)蛋白4C抗體

2,2,6,6四... Mupirocin 質(zhì)量規(guī)格：>920U/MG,USP自噬相關(guān)蛋白16A抗體

十九 Tertbuthyl Pitavastatin 質(zhì)量規(guī)格：>97%化自噬相關(guān)蛋白4D抗體

七 Docetaxel anhydrous 質(zhì)量規(guī)格：purity>99.0%,BR化自噬相關(guān)蛋白4A抗體

長春衍生物 Docetaxel anhydrous 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品化自噬相關(guān)蛋白7抗體

番石榴二 Docetaxel trihydrate 質(zhì)量規(guī)格：含量>99.0%化自噬相關(guān)蛋白16A抗體

β Docetaxel trihydrate 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品化自噬相關(guān)蛋白9A抗體
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人細(xì)胞；GBC-SD-Cas9-775供應(yīng)商總大豆皂苷B中文別名：總大豆皂甙B  

CAS登錄號：新品待定

分子式：（見結(jié)構(gòu)式圖）

分子量：（見結(jié)構(gòu)式圖）

分子結(jié)構(gòu)：

外觀：白色粉末

規(guī)格：20 mg/支

純度：≥ 98%

用途：用于含量測定/鑒定/藥理實(shí)驗(yàn)等。

提取來源：豆科植物大豆Glycinemax(L.)merr種子

溶解性：易溶于熱水、含水稀醇、熱和熱乙醇中;難溶于、苯，乙酸乙醋等極性較小的有機(jī)溶劑中;在含水丁醇和戊醇中溶解度較好。

：具有抗脂質(zhì)氧化、、。

貯存條件： 4℃冷藏、密封、避光

有效期： 2年