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傳代方法：

產(chǎn)品僅用于科研收到細(xì)胞后，取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況。

（一）如果細(xì)胞未長(zhǎng)滿，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶?jī)?nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。。

（二）如果細(xì)胞已長(zhǎng)滿，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：

1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶，細(xì)胞隨即脫落下來。

3. 加入6-8ml完全培養(yǎng)基，吸出，分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二。

注意：傳代后一半用我們的培養(yǎng)基，一半用你們的，以免細(xì)胞不適應(yīng)而造成生長(zhǎng)不好。

細(xì)胞名稱 人細(xì)胞；U-2OS

形態(tài)特性: 上皮樣

生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)

特征特性: U-2OS是由J.Ponten和E.Saksela于1964年從一名15歲女孩的脛骨中度分化的中得出。

培養(yǎng)條件: McCoy＇s5AMedia(ModifiedwithTricine)10%FBS

傳代方法: 1:3傳代,2-3天傳一代

傳代情況: C5

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

注意事項(xiàng)：

1.接收到細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張）。

2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。

3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。

4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。

5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。

6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。

7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。

5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6）產(chǎn)品僅用于科研觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
特別聲明：本產(chǎn)品及我公司所售其他產(chǎn)品均為科研類試劑產(chǎn)品，嚴(yán)禁用于藥物、醫(yī)療及其他非科研用途。

雙D甘露糖 Diethyl dithio carbamic acid silver salt 質(zhì)量規(guī)格：ARCSKI抗體

雙D半乳糖 2,6Dibromophenolindophenol Na salt 質(zhì)量規(guī)格：AR周期素H抗體

βD半乳糖五 Eriochrome black T 質(zhì)量規(guī)格：IND信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白亞基8抗體

D葡萄糖 Eriochrome® Blue Black R 質(zhì)量規(guī)格：IND活化半胱蛋白酶蛋白3抗體

1,2O異亞基D... Eriochrome® Blue Black B 質(zhì)量規(guī)格：IND抗Ⅵ型膠原抗體

1,2:3,5雙O異亞... Fluorescein 質(zhì)量規(guī)格：IND半胱蛋白酶8抗體

D半乳糖 Fluorescein 質(zhì)量規(guī)格：AR,90%核心結(jié)合因子α1抗體(成骨特異性轉(zhuǎn)錄因子)Cbfα1

βD葡萄糖五 Ferroin indicator solution 質(zhì)量規(guī)格：AR細(xì)胞表面趨化因子受體1抗體

αD(+)五葡萄糖 Glyoxalbis(2hydroxyanil) 質(zhì)量規(guī)格：AR；98%細(xì)胞表面趨化因子受體2抗體

葡萄糖一水 Hydroxynaphthol blue 質(zhì)量規(guī)格：金屬滴定指示劑細(xì)胞表面趨化因子受體4抗體

三蔗糖 1Hydroxyptoluidinoanthraquinone 質(zhì)量規(guī)格：ARCD10抗體

D山梨糖 Litmus 質(zhì)量規(guī)格：AR離子通道蛋白2抗體

D塔格糖 Methyl orange 質(zhì)量規(guī)格：IND細(xì)胞角蛋白8抗體

溴αD葡萄糖 Methyl Red sodium salt 質(zhì)量規(guī)格：INDcmer原癌基因酪激酶抗體

2,3,4,6四o... Methyl Red sodium salt 質(zhì)量規(guī)格：ACS reagent,95 %前列氧化環(huán)化酶1抗體

2,3,4,6四基D... mMethyl red 質(zhì)量規(guī)格：指示劑Ⅰ型膠原抗體

L()阿拉伯糖 Murexide 質(zhì)量規(guī)格：INDⅤ型膠原抗體
人細(xì)胞；U-2OS說明書野馬追內(nèi)酯B877822-40-7英文名：Eupalinolide B  

CAS登錄號(hào)：877822-40-7

分子式：C24H30O9

分子量：462.29

分子結(jié)構(gòu)：

外觀：無色油狀物

規(guī)格：20mg/支

純度：≥ 98%

用途：用于含量測(cè)定/鑒定/藥理實(shí)驗(yàn)等。

提取來源：野馬追地上全草，是菊科植物輪葉澤蘭的干燥地上部分。

旋光度：-93°（c 0.19，CHCl3）

：野馬追有、、、降壓等功能，用于、多痰、頭疼、、、。

貯存條件： 4℃冷藏、密封、避光

有效期： 2年