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傳代方法：

產(chǎn)品僅用于科研收到細胞后，取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況。

（一）如果細胞未長滿，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。。

（二）如果細胞已長滿，即可進行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：

1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶，細胞隨即脫落下來。

3. 加入6-8ml完全培養(yǎng)基，吸出，分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二。

注意：傳代后一半用我們的培養(yǎng)基，一半用你們的，以免細胞不適應(yīng)而造成生長不好。

細胞名稱 小鼠細胞；P3/NSI/1-Ag4-1

形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣

生長特性: 懸浮生長

特征特性: 該細胞系是P3X63Ag8細胞的非分泌型，可合成Kappa鏈但不分泌，表達H-2d，不需HAT。

培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco＇sModifiedEagle＇sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

傳代方法: 保持細胞密度在1×105～1×106viablecells/ml之間，每周換液2～3次

傳代情況: C2

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

注意事項：

1.接收到細胞，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張）。

2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。

3.嚴(yán)格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。

4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。

5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。

6.1000rpm，5min離心，重懸細胞。

7.換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。

操作要點：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。

5）將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6）產(chǎn)品僅用于科研觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代，細胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗。
特別聲明：本產(chǎn)品及我公司所售其他產(chǎn)品均為科研類試劑產(chǎn)品，嚴(yán)禁用于藥物、醫(yī)療及其他非科研用途。

Mono-POC泰諾福韋Mono-POC211364-69-1

MQAE(氯離子熒光探針)N-(Ethoxycarbonylmethyl)-6-methoxyquinolinium162558-52-3

MUG;4-甲基傘型酮-beta-D-葡糖苷酸4-MUG質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

N-(1,3,4-Thiadiazolyl)煙酰胺N-(1,3,4-Thiadiazolyl)nicotinamide質(zhì)量規(guī)格：美國進口

N-(1-芘基)馬來酰亞胺(>97.0%(HPLC))N-(1-Pyrenyl)maleimide質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(HPLC)

N-(2-丁二酰)氟伏沙明N-(2-Succinyl)259526-43-7

N-(2-羧基苯甲酰)-(-)-10,2-樟腦磺內(nèi)酰胺(>98.0%(HPLC)(T))N-(2-Carboxybenzoyl)-(-)-10,2-camphorsultam質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T)

N-(2-羧乙基)亞氨基二乙酸(>98.0%(T))N-(2-Carboxyethyl)iminodiacetic6245-75-6

N-(4-羥基苯乙酰)-精胺N-(4-Hydroxyphenylacetyl)-spermine質(zhì)量規(guī)格：美國進口

N-(羥甲基)煙酰胺N-(Hydroxymethyl)nicotinamide質(zhì)量規(guī)格：美國進口

N'-（三苯甲基）-L-天冬酰胺N'-Trityl-L-asparagine質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

N-（乙酰氨基）亞氨基二乙酸二鈉鹽ADAsalt

N,N',N''-三苯基-1,3,5-苯三胺(>98.0%(HPLC)(T))102664-66-4

N,N'-二芐基-4,13-二氮雜-18-冠6-醚(>98.0%(GC)(T))N,N'-Dibenzyl-4,13-diaza-18-crown69703-25-9

N,N'-二琥珀酰亞胺基碳酸酯(>98%,EP)N,N'-Disuccinimidyl(DSC)
小鼠細胞；P3/NSI/1-Ag4-1價格1-(Trifluoroacetyl)imidazole　1-(三氟乙酰)咪唑(用于GC衍生化,≥98.5%)　質(zhì)量規(guī)格：>99%

2,3-Dibromopropionamide　2,3-二溴丙酰胺(98%)　質(zhì)量規(guī)格：>99%

Talc　滑石粉(800目)　質(zhì)量規(guī)格：>99%

Talc　滑石粉(藥用級,325目)　質(zhì)量規(guī)格：>99%

pHstandard－Borax　硼砂pH標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(硼砂PH(25℃)：9.18)　質(zhì)量規(guī)格：>99%

3-Phenoxybenzylalcohol　3-苯氧芐醇(98%)　質(zhì)量規(guī)格：>99%

Pectin　果膠(半乳糖醛酸(干基計)≥74.0%)　質(zhì)量規(guī)格：>99%(T),標(biāo)準(zhǔn)品

Tributylphosphate　磷酸三丁酯(AR,99%)　質(zhì)量規(guī)格：>99%(TLC)，標(biāo)準(zhǔn)品

Tributylphosphate　磷酸三丁酯(CP)　質(zhì)量規(guī)格：>99%,(Src/Abl)酪氨酸激酶雙重抑制劑

Tributylphosphate　磷酸三丁酯(標(biāo)準(zhǔn)品)　質(zhì)量規(guī)格：>99%，5N

Bentonite　皂土(膨潤土)(BentoneSD-1,適于中至低極性溶劑)　質(zhì)量規(guī)格：>99%,AR

Bentonite　皂土(膨潤土)(BentoneSD-2,適于中高極性溶劑)　質(zhì)量規(guī)格：>99%,AR

Activatedcharcoal　活性炭粉(AR,200目,粉末狀,褐色)　質(zhì)量規(guī)格：>99%,AR

Activatedcharcoal　活性炭(CP,200目,粉末狀,褐色)　質(zhì)量規(guī)格：>99%,AR

Activatedcharcoal　活性炭顆粒(AR,20-50目)　質(zhì)量規(guī)格：>99%,AR