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傳代方法：

產(chǎn)品僅用于科研收到細(xì)胞后，取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況。

（一）如果細(xì)胞未長滿，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。。

（二）如果細(xì)胞已長滿，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：

1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶，細(xì)胞隨即脫落下來。

3. 加入6-8ml完全培養(yǎng)基，吸出，分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二。

注意：傳代后一半用我們的培養(yǎng)基，一半用你們的，以免細(xì)胞不適應(yīng)而造成生長不好。

細(xì)胞名稱 兔正常肺上皮細(xì)胞；RNLEC/HL-029RabbitNormalLungEpithelialCellsRNLEC/HL-029

形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣

生長特性: 懸浮生長

特征特性: 該細(xì)胞屬專利保藏，其特征特性尚未公開。

培養(yǎng)條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle＇sBalancedSalts)10%FBS

傳代方法: 1:3傳代，3-4天傳1次

傳代情況: C5

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

注意事項(xiàng)：

1.接收到細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張）。

2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。

3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。

4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。

5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。

6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。

7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。

5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6）產(chǎn)品僅用于科研觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
特別聲明：本產(chǎn)品及我公司所售其他產(chǎn)品均為科研類試劑產(chǎn)品，嚴(yán)禁用于藥物、醫(yī)療及其他非科研用途。

雜交瘤細(xì)胞；41002Eicosanyl caffeate分子式：C29H48O4

雜交瘤細(xì)胞；2G4Octadecyl p-coumarate分子式：C27H44O3

雜交瘤細(xì)胞；6B8D11H12Caffeic acid phenethyl ester分子式：C17H16O4

雜交瘤細(xì)胞；5G9A10E3Ethyl cinnamate分子式：C11H12O2

雜交瘤細(xì)胞；4E5F4A11Sodium danshensu分子式：C9H9NaO5

雜交瘤細(xì)胞；D94-Methoxycinnamyl alcohol分子式：C10H12O2

雜交瘤細(xì)胞；LW-5F3Methyl 4-prenyloxycinnamate分子式：C15H18O3

雜交瘤細(xì)胞；4F9(E)-Cinnamyl-(Z)-p-coumarate分子式：C18H16O3

雜交瘤細(xì)胞；4D2Benzyl p-coumarate分子式：C16H14O3

雜交瘤細(xì)胞；15A7Cinnamyl isoferulate分子式：C19H18O4

雜交瘤細(xì)胞；3G4Cinnamyl caffeate分子式：C18H16O4

雜交瘤細(xì)胞；2B1Cinnamyl coumarate分子式：C18H16O3

雜交瘤細(xì)胞；M08#15Benzyl ferulate分子式：C17H16O4

雜交瘤細(xì)胞；19A43-Hydroxy-1-(4-hydroxyphenyl)propan-1-one分子式：C9H10O3

雜交瘤細(xì)胞；15B8Ethyl 3-(4-hydroxyphenyl)propionate分子式：C11H14O3

雜交瘤細(xì)胞；4A101-O-p-Coumaroylglycerol分子式：C12H14O5

雜交瘤細(xì)胞；2CKmeriol分子式：C12H18O5

雜交瘤細(xì)胞；1B12株Triandrin分子式：C15H20O7

雜交瘤細(xì)胞；2H5B12C3γ-Asarone分子式：C12H16O3

雜交瘤細(xì)胞；2B4Methoxyeugenol分子式：C11H14O3
兔正常肺上皮細(xì)胞；RNLEC/HL-029RabbitNormalLungEpithelialCellsRNLEC/HL-029說明書苯乙酰谷氨酰胺 Acetyl glutamine 規(guī)格：40mg/支

馬尿酸 Hippuric acid 規(guī)格：40mg/支

5'－羥基吲哚乙酸 5'hydroxyindoleacetic acid 規(guī)格：10mg/支

4'－羥基乙酸 4'hydroxy benzene acetic acid 規(guī)格：10mg/支

5＇-胞苷酸 5 '- cytidylic acid 規(guī)格：10mg/支

鮭降鈣素(鑒別） Salmon calcitonin (differential) 規(guī)格：1mg/支

門冬酰胺酶（歐文菌） Asparaginase (Ou Wenjun) 規(guī)格：5mg/支

門冬酰胺酶（大腸） Asparaginase (e.) 規(guī)格：5mg/支

尤瑞克林 Yurek Lin 規(guī)格：1.6PNA單位/支

醋酸奧曲肽 Octreotide acetate 規(guī)格：20mg/支

賴脯 Insulin lispro 規(guī)格：25mg/支

胸腺五肽 Five thymus peptide 規(guī)格：50mg/支