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傳代方法：

產(chǎn)品僅用于科研收到細(xì)胞后，取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況。

（一）如果細(xì)胞未長滿，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。。

（二）如果細(xì)胞已長滿，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：

1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶，細(xì)胞隨即脫落下來。

3. 加入6-8ml完全培養(yǎng)基，吸出，分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二。

注意：傳代后一半用我們的培養(yǎng)基，一半用你們的，以免細(xì)胞不適應(yīng)而造成生長不好。

細(xì)胞名稱 小鼠雜交瘤細(xì)胞；HBBrE-1

形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣

生長特性: 半貼壁生長

特征特性: 該細(xì)胞屬專利保藏，其特征特性尚未公開。

培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

傳代方法: 1:3傳代，3-4天傳1次

傳代情況: C7

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

注意事項(xiàng)：

1.接收到細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X,200X各一張）。

2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。

3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。

4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。

5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。

6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。

7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。

5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6）產(chǎn)品僅用于科研觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
特別聲明：本產(chǎn)品及我公司所售其他產(chǎn)品均為科研類試劑產(chǎn)品，嚴(yán)禁用于藥物、醫(yī)療及其他非科研用途。

NCI-H596(人肺腺鱗癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 A10(大鼠主動脈平滑肌細(xì)胞)

CL-0329Chang liver (CCL13) (人張氏肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

CNDP1 Others Mouse 小鼠 CNDP1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

Psi2 DAP小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 Psi2 DAP mouse embryo fibroblasts DMEM培養(yǎng)基+10%FBS

IL1B Protein Mouse 重組小鼠 IL-1 beta / IL1B 蛋白

小鼠肺動脈成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL

phospho-ERK1(Thr197/Thr202)  磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1/2抗體規(guī)格： 0.2ml

Eph receptor B2/Ephb2   Ephb2抗體規(guī)格： 0.1ml

ERK1/MAPK3  絲裂原活化蛋白激酶3抗體規(guī)格： 0.1ml

MAPK4  絲裂原活化蛋白激酶4抗體規(guī)格： 0.1ml

DUSP1/MKP-1  絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1抗體規(guī)格： 0.2ml

異吉非羅齊（吉非羅齊雜質(zhì)） 規(guī)格：含量634μg/mg-739μg/mg,BR Tobramycin Sulfate

異茴芹內(nèi)酯 規(guī)格：效價測定 Tobramycin Sulfate

異環(huán)磷酰（標(biāo)準(zhǔn)品） 規(guī)格：>98%,USP30,BR Tolnaftate

異環(huán)磷酰 規(guī)格：>99.0% Topotecan HCl

異槲皮苷(標(biāo)準(zhǔn)品) 規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Topotecan HCl

異葒草苷(標(biāo)準(zhǔn)品) 規(guī)格：>99%,USP32 Torasemide

異鉤藤堿(標(biāo)準(zhǔn)品) 規(guī)格：含>99.0% Travoprost

異甘草素（標(biāo)準(zhǔn)品） 規(guī)格：>98.5%,USP32,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) Trazodone HCl

異甘草素 規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Trazodone HCl

異甘草苷（標(biāo)準(zhǔn)品） 規(guī)格：>99.0%,BR Trilostane
小鼠雜交瘤細(xì)胞；HBBrE-1說明書乙脫氫酶(ADH)酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： ADH ELISA Kit

抗多發(fā)性肌炎抗體(PM-Scl/PM-1)ELISA檢測試劑盒Humanpolymyositis-sclerosisaibody,PM-Scl/PM-1ELISAKit 96T/48T

γ-氨基受體基α1(GABRA1)酶聯(lián)免疫試劑盒 Rat Gamma-aminobyric acid receptor subunit alpha-1,GABRA1 ELISA kit

CLIAKitfo4(Mousethyroxine)ELISAKit狀規(guī)格：48T/96T

體RUNX3基因重組表達(dá)載體(pcDNA-RUNX3)感受態(tài)菌DH-5α1毫升

ELISAKitLKM抗肝微粒體抗體規(guī)格：48T/96T

GTP酶活化蛋白(GAP)酶聯(lián)免疫試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

兔素A2(TXA2)酶聯(lián)免疫試劑盒 Rabbit Thromboxane A2,TXA2 ELISA Kit

羥脯酸糖蛋白(HRGP)酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： HRGP ELISA Kit

RabbitEpidermalgrowthfactor,EGF酶聯(lián)免疫試劑盒表皮生長因子(EGF)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格：96T/48T

Humanai-myelinaibodyIgA,AMAIgA酶聯(lián)免疫試劑盒型瓜氨酸波形蛋白抗體(MCV)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格：96T/48T

HumanCaspase3,Casp-3ELISAKit胱天蛋白酶3(Casp-3)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格：96T/48T