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上海聯祖生物科技有限公司
產品展廳
MDHm線粒體蘋果酸脫氫酶測試劑盒微量法
  • 品牌:聯祖
  • 產地:國產
  • 型號:50管/48樣
  • 貨號:LZ-01582S
  • 發布日期: 2021-02-24
  • 更新日期: 2025-01-17
產品詳請
產地 國產
品牌 聯祖
貨號 LZ-01582S
用途 公司產品僅用于科研
英文名稱
包裝規格 50管/48樣
純度 %
CAS編號
別名 線粒體蘋果酸脫氫酶(MDHm)測試盒
分子式
是否進口



血液樣本的收集:
全血根據收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及枸櫞酸鈉。
【友情提示】:本產品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細閱讀購買說明!

產品名稱

規格

檢測方法

貨號

MDHm線粒體蘋果酸脫氫酶測試劑盒微量法

50管/48樣

紫外分光光度法

LZ-01582S

商品介紹:

測定意義
乙酰輔酶A廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中。是生物體能源物質代謝過程中產生的一種重要的中間代謝產物。在體內能源物質代謝中是一個樞紐性的物質。糖、脂肪、蛋白質三大營養物質通過乙酰輔酶A匯聚成一條共同的代謝通路-三羧酸循環和氧化磷酸化,經過這條通路氧化生成二氧化碳和水,釋放能量用于ATP合成。此外,乙酰輔酶A是合成脂肪酸,酮體,膽固醇及其衍生物等生理活性物質的前體物質。

測定原理

蘋果酸脫氫酶可催化蘋果酸和NAD生成草酰乙酸和NADH。檸檬酸合酶可催化乙酰輔酶A和草酰乙酸生成檸檬酸和輔酶A。利用蘋果酸脫氫酶和檸檬酸合酶的偶聯反應,乙酰輔酶A含量和NADH的生成速率成正比,340nm下吸光值的上升速率反應了乙酰輔酶A含量的高低。

需自備的儀器和用品

紫外分光光度計/酶標儀、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

實驗通用規則:
1、將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
2、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產生氣泡而使吸取量不準確。
3、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發。
4、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
5、實驗時,要使底物避光保存。
6、洗板時,每次洗液加入后,應靜置1分鐘,使清洗更加。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
7、要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復到室溫,以使結果更穩定。
8、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
9、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標準品時。
10、液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。

選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。

操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數。
1.        加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。
3.        溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。
4.        每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。
5.        溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。
6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。
8.       用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測。

中國倉鼠肺細胞;CHL[Phe2,Orn8]-催產素質量規格:>95%,BR[Phe2,Orn8]-Oxytocin

BxPC-3細胞,人原位腺癌細胞 人皮膚纖維微細胞系,Malmc細胞 小鼠漿細胞瘤;MPC-11[Ser4,Ile8]-催產素質量規格:>95%,BR[Ser4,Ile8]-Oxytocin

HT-1080(人纖維細胞) 5×106cells/瓶×2[Tyr34]-甲狀旁腺激素(7-34) 酰胺 (牛)質量規格:>95%,BR[Tyr34]-pTH (7-34) amide (bovine)

Gibco 17104019 Collagenase Type IV 1g[Trp4]-Kemptide質量規格:>95%,BR[Trp4]-Kemptide

人髓核細胞裂解物HNPCL(標準品)質量規格:HPLC≥98%,標準品Coumarin
人胚;MRC-5氧化型輔酶Ⅱshēng huà shì jì容量:RT25克

HA Others H5N8 甲型 H5N8 (A/duck/NY/191255-59/2002) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) 5-溴尿嘧啶 5-BroMourccil;5-BroMo-2,4(1H,3H)-pyriMidinqdionq; 21-0-7

NSC,大鼠神經干細胞溴紫葡萄糖肉湯shēng huà shì jì容量:25克

CD38 Others Human 人 SCARB3 人細胞裂解液 (陽性對照) 抗生素Ⅱ號培養基(Ph6.5~6.6)shēng huà shì jì容量:RT25克

大鼠視網膜微內皮細胞完全培養基 100mLRhamnose 5g/10g/100g 國產
EPHA3 Others Human 人 EphA3 人細胞裂解液 (陽性對照) 辛伐他汀二聚體雜質Simvastatin Dimer Impurity質量規格:美國進口

臍內皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)辛伐他汀,1-芘乙酰酯Simvastatin, 1-Pyreneacetyl Ester質量規格:美國進口

JK(Jurkat)細胞,人細胞瘤細胞 615小鼠網織細胞性瘤株,L615細胞 人平滑肌細胞裂解物HCSMCL2,3-脫氫辛伐他汀酸鈉鹽2,3-Dehydro Simvastatin Acid  Salt質量規格:美國進口

NCI-H2227(人小細胞細胞) 5×106cells/瓶×2脫氫辛伐他汀Dehydro Simvastatin質量規格:美國進口

Calu-3(人) 5×106cells/瓶×2 CL-0062CHO-K1(倉鼠卵巢細胞亞株)5×106cells/瓶×2 正常小鼠Leydig細胞;TM36'-羧基辛伐他汀6'-Carboxy Simvastatin質量規格:美國進口
MDHm線粒體蘋果酸脫氫酶測試劑盒微量法AsPC-1(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-R091大鼠成骨細胞完全培養基100mL EB病毒轉化的人B細胞;KM0501本氧基醋酸,英文名或英文縮寫:pxenoxyacetic acid,級別:CP,97%,規格:5毫升

CM-H047人肝竇內皮細胞完全培養基100mL重醋銨;重醋铔,氮輕紅礬, cMMoniuM dichroMctq7789-9-2

PDHA1 Others Human 人 PDHA1 / C54G1 (aa 30-390) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 氘代二錄烷-D2 DICHLOROMqTHcNq-D2 1662-00-2

人少突膠質細胞HO6-溴己酸,英文名或英文縮寫:6-Bromohexanoic acid,級別:AR,98%,規格:5克

非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS3;Vero-HCV-NS3 人細胞,A-704細胞 AGS(胃腺癌細胞)BisBenzimideHoechstNo.33342 25mg/100mg/500mg Sigma B2261


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