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免疫熒光技術(shù)的實驗步驟：

一、準(zhǔn)備好試劑與儀器：

磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。

二、實驗步驟

1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上，十分鐘后棄去，使標(biāo)本保持一定濕度。

2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液，使其完全覆蓋標(biāo)本，置于有蓋搪瓷盒內(nèi)，保溫一定時間以三十分鐘為參考。

3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS沖洗后，再按順序過0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分鐘，并不停地?fù)u晃振蕩。

4.取出玻片，用濾紙吸去多余水分，但不使標(biāo)本干燥，加一滴緩沖甘油，以蓋玻片覆蓋。

5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。
別 名 67 kDa cytokeratin; CK 1; CK1; Cytokeratin1; EHK1; Hair alpha protein; K 1; K1; Keratin 1; Keratin type II cytoskeletal 1; Keratin1; KRT 1; KRT1A; K2C1_HUMAN; Keratin, type II cytoskeletal 1; Cytokeratin-1; CK-1; Keratin-1; Type-II keratin Kb1.

純化方法 affinity purified by Protein A

儲 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Soium zde

產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500 

產(chǎn)品名稱	細(xì)胞角蛋白1抗體0.1ml/100μg0.2ml/200μg
英文名稱	Anti-CK1
貨號	LZK64858

英文名稱 Anti-CK1

中文名稱 細(xì)胞角蛋白1抗體

濃 度 1mg/1ml

規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg

抗體來源 Rabbit

克隆類型 polyclonal

交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse

產(chǎn)品類型 一抗

研究領(lǐng)域 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 干細(xì)胞 激酶和磷酸酶

蛋白分子量 predicted molecular weight: 70kDa

性 狀 Lyophilized or Liquid

免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human CK1

亞 型 IgG

抗體的制備過程：

1. 免疫原：普通的大分子蛋白，通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免疫原；小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原，常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。

2. 免疫動物：常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等，大量 時需要用到狗、綿羊、山羊等。

3. 免疫血清的收集：一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血，家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用采血，家兔、山羊、綿羊可采用采血。

4. 免疫血清的純化與鑒定：得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化，利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析，具有高效，特異性強(qiáng)，純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。

5. 免疫血清的保存：抗體一般比較穩(wěn)定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價，而真空干燥保存時間可以更久。聯(lián)祖保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。

 

 

抗體分子標(biāo)記技術(shù)：

（一）原理

當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。

（二）準(zhǔn)備

1.試劑

經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體；0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5；無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液；100g/L三醋酸；70%乙醇；新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5）；胺T反應(yīng)終止緩沖液；

2.儀器

凝膠過濾柱；￥-記數(shù)器；玻璃纖維濾。

（三）操作要點

1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行；

2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì)，可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m，并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml；

3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年；

4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天）；

5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低；

6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。

月桂酰喃葡萄糖 含量：≥ 98% 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格：20 mg/支

NDodecylglucopyranoside 含量：≥ 98% 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格：20 mg/支

3丙十二二甜菜 含量：>99% 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格：20mg/支

NDodecylN,Ndimethyl3ammonio1propanesulfonate 含量：≥ 98% 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格：20 mg/支

月桂酰麥芽糖苷 含量：≥ 98% 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格：20 mg/支

NDodecylβMaltoside 含量：≥ 98% 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格：20 mg/支

新霉素 含量：≥ 98% 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格：20 mg/支

Neomycin Sulfate 含量：≥ 98% 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格：20 mg/支

琥珀;Butane diacid 110156 訂購|咨詢  定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 20mg

蒿;Artemether 71963774 訂購|咨詢  定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 100mg

廣防風(fēng)苷A;Epimeredisid  訂購|咨詢  定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 20mg

防諾林;Fangchiline 436771 訂購|咨詢  定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 20mg

地黃苷D;RhMannioside D 81720083 訂購|咨詢  定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 20mg

對傘;4Isopropyltolu 99876 訂購|咨詢  定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 20mg

次大風(fēng)子素;Hydcarpin 51419488 訂購|咨詢  定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 10mg

茶多;Tea polyphel 84650602 訂購|咨詢  定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 20mg

白頭翁皂苷D;Pulsatilla sa 68027156 訂購|咨詢  定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 20mg

白花前胡;Ulopterol 28095183 訂購|咨詢  定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 20mg

7氨4香;7aMi 26093312 訂購|咨詢  定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 20mg

孔雀石綠;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 2437298 訂購|咨詢  定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 0.25g

螺銨鹽;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 1420048 訂購|咨詢  定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 0.1g

吡唑草;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 67129082 訂購|咨詢  定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 0.1g

惡草;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 19666309 訂購|咨詢  定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 0.1g
2-脫氧-2-氟-D-葡萄糖，100mg 進(jìn)口/原裝 Saxagliptin monohydrate 規(guī)格：>98%,BR,單水合物

2-脫氧-2-氟-D-葡萄糖，25mg 進(jìn)口/原裝 Saxagliptin HCL 規(guī)格：>98%,BR

麥芽三糖，1g 進(jìn)口/原裝 Sauchinone 規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

麥芽三糖，5g 進(jìn)口/原裝 Sasapyrine 規(guī)格：>98%,BR

4-硝基基-α-D-吡喃甘露糖苷，1g 進(jìn)口/原裝 Sasapyrine 規(guī)格：>98%,BR

細(xì)胞角蛋白1抗體0.1ml/100μg0.2ml/200μg4-硝基基-α-D-吡喃甘露糖苷，250mg 進(jìn)口/原裝 Sarsasapogenin 規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品"

5'-二磷酸葡萄糖腺苷二鈉鹽，25mg 進(jìn)口/原裝Sarsasapogenin 規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

5'-二磷酸葡萄糖腺苷二鈉鹽，5mg 進(jìn)口/原裝 Sarcosine  規(guī)格：>99%,BR

1，5二磷酸核酮糖，10mg 進(jìn)口/原裝 Sarafloxacin HCl 規(guī)格：>97%,BR